您何時需要使用色譜柱呢？

　　分析非常復(fù)雜，而且性質(zhì)差異很大的混合化合物時;

　　需要一個單一的方法來分離極性和非極性的可離子化或是中性化合物，而且使用可用在液質(zhì)的流動相時;

　　無法使用梯度分析時;?發(fā)現(xiàn)單一的疏水或是離子作用無法產(chǎn)生足夠的分離效果時;

　　不想在太多不同的色譜柱中挑選以進(jìn)行不斷的方法篩選時;

　　發(fā)現(xiàn)單一疏水或是離子作用的色譜柱產(chǎn)生峰形差和柱效低時;

　　進(jìn)行離子化合物的制備時;

　　在分析復(fù)雜的混合物時，想節(jié)約金錢和時間；

　　菲羅門色譜柱異常沖洗步驟：

　　1、低pH的高濃度中性鹽（如0.5M硫酸鈉溶液，硫酸調(diào)pH 3.0）沖洗15倍柱體積，有助于移除堿性蛋白；

　　2、含有機(jī)溶劑（如10%-20%的甲醇、乙腈）的緩沖鹽溶液（如50mM磷酸鹽緩沖液，pH 7.0）沖洗15倍柱體積，有助于沖洗掉疏水蛋白；

　　3、加入助溶劑有助于除去固定相上強(qiáng)吸附的物質(zhì)（如通過氫鍵作用吸附等）；

　　4、按照色譜柱測試報告的進(jìn)樣條件進(jìn)對照品測試柱效；

　　菲羅門色譜柱技術(shù)的差距在哪里？

　　色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗積累。

　　國內(nèi)和國外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國內(nèi)公司以前都不會自己開發(fā)填料，一般買國外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因為裝柱歷史短，經(jīng)驗積累少，裝柱工藝也沒有*達(dá)到國外水平。另外，對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比，差距很大。